ირანში გაყიდულ ჩვილ ბავშვთა ფორმულასა და რძის ფხვნილში მელამინის აღმოჩენის მეთოდის ვალიდაცია

გმადლობთ, რომ ეწვიეთ nature.com-ს. თქვენს მიერ გამოყენებულ ბრაუზერის ვერსიას CSS-ის შეზღუდული მხარდაჭერა აქვს. საუკეთესო გამოცდილებისთვის გირჩევთ გამოიყენოთ ბრაუზერის უახლესი ვერსია (ან გამორთოთ თავსებადობის რეჟიმი Internet Explorer-ში). გარდა ამისა, მხარდაჭერის უწყვეტი უზრუნველყოფის მიზნით, ეს საიტი არ შეიცავს სტილებს ან JavaScript-ს.
მელამინი აღიარებული საკვების დამაბინძურებელია, რომელიც შესაძლოა გარკვეულ საკვებ კატეგორიებში შემთხვევითაც და განზრახაც იყოს წარმოდგენილი. კვლევის მიზანი იყო მელამინის აღმოჩენისა და რაოდენობრივი განსაზღვრის დადასტურება ჩვილ ბავშვთა ფორმულასა და რძის ფხვნილში. გაანალიზდა ირანის სხვადასხვა რეგიონიდან კომერციულად ხელმისაწვდომი საკვების 40 ნიმუში, მათ შორის ჩვილ ბავშვთა ფორმულა და რძის ფხვნილი. ნიმუშებში მელამინის სავარაუდო შემცველობა განისაზღვრა მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფიის-ულტრაიისფერი (HPLC-UV) სისტემის გამოყენებით. კალიბრაციის მრუდი (R2 = 0.9925) აგებული იქნა მელამინის 0.1–1.2 მკგ/მლ−1 დიაპაზონში აღმოსაჩენად. რაოდენობრივი განსაზღვრისა და აღმოჩენის ზღვრები იყო შესაბამისად 1 მკგ/მლ−1 და 3 მკგ/მლ−1. მელამინი შემოწმდა ჩვილ ბავშვთა ფორმულასა და რძის ფხვნილში და შედეგებმა აჩვენა, რომ მელამინის დონე ჩვილ ბავშვთა ფორმულასა და რძის ფხვნილის ნიმუშებში იყო შესაბამისად 0.001–0.095 მგ/კგ−1 და 0.001–0.004 მგ/კგ−1. ეს მნიშვნელობები შეესაბამება ევროკავშირის კანონმდებლობას და Codex Alimentarius-ს. მნიშვნელოვანია აღინიშნოს, რომ მელამინის შემცირებული შემცველობის მქონე ამ რძის პროდუქტების მოხმარება მომხმარებლის ჯანმრთელობისთვის მნიშვნელოვან რისკს არ წარმოადგენს. ამას ასევე ადასტურებს რისკის შეფასების შედეგები.
მელამინი არის ორგანული ნაერთი მოლეკულური ფორმულით C3H6N6, რომელიც მიიღება ციანამიდისგან. მას აქვს ძალიან დაბალი ხსნადობა წყალში და დაახლოებით 66% აზოტია. მელამინი ფართოდ გამოყენებული სამრეწველო ნაერთია, რომელსაც ფართო ლეგიტიმური გამოყენება აქვს პლასტმასის, სასუქების და საკვების გადამამუშავებელი აღჭურვილობის (მათ შორის საკვების შესაფუთი და სამზარეულოს ჭურჭლის) წარმოებაში1,2. მელამინი ასევე გამოიყენება, როგორც წამლის მატარებელი დაავადებების სამკურნალოდ. მელამინში აზოტის მაღალმა წილმა შეიძლება გამოიწვიოს ნაერთის ბოროტად გამოყენება და საკვების ინგრედიენტებისთვის ცილის მოლეკულების თვისებების მინიჭება3,4. ამიტომ, საკვებ პროდუქტებში, მათ შორის რძის პროდუქტებში მელამინის დამატება ზრდის აზოტის შემცველობას. ამრიგად, შეცდომით დაასკვნეს, რომ რძეში ცილის შემცველობა უფრო მაღალი იყო, ვიდრე სინამდვილეში იყო.
დამატებული მელამინის ყოველი გრამისთვის საკვებში ცილის შემცველობა 0.4%-ით იზრდება. თუმცა, მელამინი წყალში ადვილად ხსნადია და შეიძლება უფრო სერიოზული ზიანი მიაყენოს. თხევად პროდუქტებში, როგორიცაა რძე, 1.3 გრამი მელამინის დამატებამ შეიძლება რძის ცილის შემცველობა 30%-ით გაზარდოს5,6. მიუხედავად იმისა, რომ მელამინი ცხოველურ და ადამიანის საკვებშიც კი ემატება ცილის შემცველობის გასაზრდელად7, Codex Alimentarius-ის კომისიამ (CAC) და ეროვნულმა ორგანოებმა არ დაამტკიცეს მელამინი, როგორც საკვები დანამატი და ის საშიშად შეფასებულია გადაყლაპვის, შესუნთქვის ან კანიდან შეწოვის შემთხვევაში. 2012 წელს, ჯანდაცვის მსოფლიო ორგანიზაციის (WHO) კიბოს კვლევის საერთაშორისო სააგენტომ მელამინი მე-2B კლასის კანცეროგენად შეიყვანა, რადგან ის შეიძლება საზიანო იყოს ადამიანის ჯანმრთელობისთვის8. მელამინის ხანგრძლივმა ზემოქმედებამ შეიძლება გამოიწვიოს კიბო ან თირკმლის დაზიანება2. საკვებში მელამინი შეიძლება შეერთდეს ციანური მჟავასთან და წარმოქმნას წყალში უხსნადი ყვითელი კრისტალები, რამაც შეიძლება გამოიწვიოს თირკმლის და შარდის ბუშტის ქსოვილის დაზიანება, ასევე საშარდე გზების კიბო და წონის დაკლება9,10. მას შეუძლია გამოიწვიოს მწვავე საკვებით მოწამვლა და მაღალი კონცენტრაციის შემთხვევაში, სიკვდილი, განსაკუთრებით ჩვილებსა და მცირეწლოვან ბავშვებში.11 ჯანდაცვის მსოფლიო ორგანიზაციამ (WHO) ასევე დაადგინა მელამინის დასაშვები დღიური ნორმა (TDI) ადამიანისთვის 0.2 მგ/კგ სხეულის წონის დღეში, CAC-ის სახელმძღვანელო პრინციპების საფუძველზე.12 აშშ-ის სურსათისა და წამლის ადმინისტრაციამ (US FDA) მელამინის მაქსიმალური ნარჩენი დონე დაადგინა 1 მგ/კგ-მდე ჩვილების ფორმულაში და 2.5 მგ/კგ-მდე სხვა საკვებში.2,7 2008 წლის სექტემბერში გავრცელდა ინფორმაცია, რომ რამდენიმე ადგილობრივმა ჩვილების ფორმულის მწარმოებელმა რძის ფხვნილს მელამინი დაამატა, რათა გაეზარდათ მათი პროდუქციის ცილის შემცველობა, რამაც გამოიწვია რძის ფხვნილით მოწამვლა და მელამინით მოწამვლის მთელი ქვეყნის მასშტაბით ინციდენტი, რომლის შედეგადაც 294 000-ზე მეტი ბავშვი დაავადდა და 50 000-ზე მეტი ჰოსპიტალიზებული იქნა.13
ძუძუთი კვება ყოველთვის არ არის შესაძლებელი სხვადასხვა ფაქტორების გამო, როგორიცაა ქალაქის ცხოვრების სირთულეები, დედის ან ბავშვის ავადმყოფობა, რაც იწვევს ჩვილების კვებისთვის ჩვილის ხელოვნური რძის გამოყენებას. შედეგად, შეიქმნა ქარხნები, რომლებიც აწარმოებენ ჩვილის ხელოვნურ ფორმულებს, რომლებიც შემადგენლობით მაქსიმალურად მიახლოებულია დედის რძესთან14. ბაზარზე გაყიდული ჩვილის ხელოვნური ფორმულა, როგორც წესი, მზადდება ძროხის რძისგან და, როგორც წესი, დამზადებულია ცხიმების, ცილების, ნახშირწყლების, ვიტამინების, მინერალებისა და სხვა ნაერთების სპეციალური ნარევით. იმისათვის, რომ იყოს დედის რძესთან მიახლოებული, ფორმულაში ცილისა და ცხიმის შემცველობა განსხვავდება და რძის ტიპის მიხედვით, ისინი გამდიდრებულია ისეთი ნაერთებით, როგორიცაა ვიტამინები და მინერალები, როგორიცაა რკინა15. რადგან ჩვილები მგრძნობიარე ჯგუფია და არსებობს მოწამვლის რისკი, რძის ფხვნილის მოხმარების უსაფრთხოება სასიცოცხლოდ მნიშვნელოვანია ჯანმრთელობისთვის. ჩინელ ჩვილებში მელამინის მოწამვლის შემთხვევის შემდეგ, მსოფლიოს ქვეყნებმა დიდი ყურადღება მიაქციეს ამ საკითხს და ამ სფეროს მგრძნობელობაც გაიზარდა. ამიტომ, განსაკუთრებით მნიშვნელოვანია ჩვილების ჯანმრთელობის დასაცავად ჩვილების ფორმულის წარმოების კონტროლის გაძლიერება. საკვებში მელამინის აღმოსაჩენად სხვადასხვა მეთოდი არსებობს, მათ შორის მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფია (HPLC), ელექტროფორეზი, სენსორული მეთოდი, სპექტროფოტომეტრია და ანტიგენ-ანტისხეულის ფერმენტ-შეკავშირებული იმუნოსორბენტული ანალიზი16. 2007 წელს აშშ-ის სურსათისა და წამლის ადმინისტრაციამ (FDA) შეიმუშავა და გამოაქვეყნა HPLC მეთოდი საკვებში მელამინისა და ციანური მჟავას დასადგენად, რომელიც მელამინის შემცველობის დასადგენად ყველაზე ეფექტური მეთოდია17.
ახალი ინფრაწითელი სპექტროსკოპიის ტექნიკის გამოყენებით გაზომილი ჩვილ ბავშვთა ფორმულაში მელამინის კონცენტრაცია მერყეობდა 0.33-დან 0.96 მილიგრამამდე კილოგრამზე (მგ კგ-1).18 შრი-ლანკაში ჩატარებულმა კვლევამ აჩვენა, რომ ნატურალური რძის ფხვნილში მელამინის დონე მერყეობდა 0.39-დან 0.84 მგ კგ-1-მდე. გარდა ამისა, იმპორტირებული ჩვილ ბავშვთა ფორმულა შეიცავდა მელამინის ყველაზე მაღალ დონეს, შესაბამისად, 0.96 და 0.94 მგ/კგ. ეს დონეები მარეგულირებელ ზღვარზე (1 მგ/კგ) დაბალია, მაგრამ მომხმარებელთა უსაფრთხოებისთვის საჭიროა მონიტორინგის პროგრამა.19
რამდენიმე კვლევამ შეისწავლა მელამინის დონე ირანულ ჩვილების ფორმულებში. ნიმუშების დაახლოებით 65% შეიცავდა მელამინს, საშუალოდ 0.73 მგ/კგ-ით და მაქსიმუმ 3.63 მგ/კგ-ით. კიდევ ერთი კვლევის თანახმად, ჩვილების ფორმულებში მელამინის დონე მერყეობდა 0.35-დან 3.40 მკგ/კგ-მდე, საშუალოდ 1.38 მკგ/კგ-ით. საერთო ჯამში, ირანულ ჩვილების ფორმულებში მელამინის არსებობა და დონე შეფასდა სხვადასხვა კვლევაში, ზოგიერთ ნიმუშში მელამინის შემცველობა აღემატებოდა მარეგულირებელი ორგანოების მიერ დადგენილ მაქსიმალურ ზღვარს (2.5 მგ/კგ/კვება).
კვების მრეწველობაში რძის ფხვნილის უზარმაზარი პირდაპირი და არაპირდაპირი მოხმარებისა და ჩვილის რძის ფორმულის განსაკუთრებული მნიშვნელობის გათვალისწინებით, ამ კვლევის მიზანი იყო რძის ფხვნილსა და ჩვილის ფორმულაში მელამინის აღმოჩენის მეთოდის ვალიდაცია. ფაქტობრივად, ამ კვლევის პირველი მიზანი იყო ჩვილის ფორმულასა და რძის ფხვნილში მელამინის გაყალბების აღმოჩენის სწრაფი, მარტივი და ზუსტი რაოდენობრივი მეთოდის შემუშავება მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფიის (HPLC) და ულტრაიისფერი (UV) დეტექციის გამოყენებით; მეორეც, ამ კვლევის მიზანი იყო ირანის ბაზარზე გაყიდულ ჩვილის ფორმულასა და რძის ფხვნილში მელამინის შემცველობის დადგენა.
მელამინის ანალიზისთვის გამოყენებული ინსტრუმენტები განსხვავდება საკვების წარმოების ადგილმდებარეობის მიხედვით. რძესა და ჩვილ ბავშვთა ფორმულაში მელამინის ნარჩენების გასაზომად გამოყენებული იქნა მგრძნობიარე და საიმედო HPLC-UV ანალიზის მეთოდი. რძის პროდუქტები შეიცავს სხვადასხვა ცილებსა და ცხიმებს, რომლებმაც შეიძლება ხელი შეუშალონ მელამინის გაზომვას. ამიტომ, როგორც აღნიშნავენ სან და სხვ. 22, ინსტრუმენტულ ანალიზამდე აუცილებელია შესაბამისი და ეფექტური გაწმენდის სტრატეგია. ამ კვლევაში ჩვენ გამოვიყენეთ ერთჯერადი შპრიცის ფილტრები. ამ კვლევაში ჩვენ გამოვიყენეთ C18 სვეტი ჩვილ ბავშვთა ფორმულასა და რძის ფხვნილში მელამინის გამოსაყოფად. სურათი 1 გვიჩვენებს მელამინის აღმოჩენის ქრომატოგრამას. გარდა ამისა, 0.1–1.2 მგ/კგ მელამინის შემცველი ნიმუშების აღდგენა მერყეობდა 95%-დან 109%-მდე, რეგრესიის განტოლება იყო y = 1.2487x − 0.005 (r = 0.9925), ხოლო ფარდობითი სტანდარტული გადახრის (RSD) მნიშვნელობები მერყეობდა 0.8-დან 2%-მდე. არსებული მონაცემები მიუთითებს, რომ მეთოდი საიმედოა შესწავლილ კონცენტრაციის დიაპაზონში (ცხრილი 1). მელამინის ინსტრუმენტული აღმოჩენის ზღვარი (LOD) და რაოდენობრივი განსაზღვრის ზღვარი (LOQ) შესაბამისად 1 მკგ mL−1 და 3 მკგ mL−1 იყო. გარდა ამისა, მელამინის ულტრაიისფერი სპექტრი ავლენდა შთანთქმის ზოლს 242 ნმ-ზე. აღმოჩენის მეთოდი მგრძნობიარე, საიმედო და ზუსტია. ეს მეთოდი შეიძლება გამოყენებულ იქნას მელამინის დონის რუტინული განსაზღვრისთვის.
მსგავსი შედეგები გამოქვეყნებულია რამდენიმე ავტორის მიერ. რძის პროდუქტებში მელამინის ანალიზისთვის შემუშავდა მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფიის ფოტოდიოდური მასივის (HPLC) მეთოდი. რაოდენობრივი განსაზღვრის ქვედა ზღვარი იყო 340 მკგ კგ−1 რძის ფხვნილისთვის და 280 მკგ კგ−1 ჩვილის ფორმულასთვის 240 ნმ-ზე. ფილაციმ და სხვებმა (2012) განაცხადეს, რომ HPLC-ით ჩვილის ფორმულაში მელამინი არ აღმოჩნდა. თუმცა, რძის ფხვნილის ნიმუშების 8% შეიცავდა მელამინს 0.505–0.86 მგ/კგ დონეზე. ტიტლმიეტმა და სხვებმა23 ჩაატარეს მსგავსი კვლევა და მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფიის-მას-სპექტრომეტრიის/MS (HPLC-MS/MS) მეთოდით განსაზღვრეს მელამინის შემცველობა ჩვილის ფორმულაში (ნიმუშის ნომერი: 72) დაახლოებით 0.0431–0.346 მგ კგ−1. ვენკატასამის და სხვ. მიერ ჩატარებულ კვლევაში... (2010), ჩვილ ბავშვთა ფორმულასა და რძეში მელამინის შესაფასებლად გამოყენებული იქნა მწვანე ქიმიის მიდგომა (აცეტონიტრილის გარეშე) და შებრუნებული ფაზის მაღალეფექტური თხევადი ქრომატოგრაფია (RP-HPLC). ნიმუშის კონცენტრაციის დიაპაზონი იყო 1.0-დან 80 გ/მლ-მდე და რეაქცია იყო წრფივი (r > 0.999). მეთოდმა აჩვენა 97.2–101.2 აღდგენა 5–40 გ/მლ კონცენტრაციის დიაპაზონში და რეპროდუცირებადობა იყო 1.0%-ზე ნაკლები ფარდობითი სტანდარტული გადახრა. გარდა ამისა, დაკვირვებული LOD და LOQ იყო შესაბამისად 0.1 გ მლ−1 და 0.2 გ მლ−124. ლუტერმა და სხვ. (2011) განსაზღვრეს მელამინის დაბინძურება ძროხის რძესა და რძეზე დაფუძნებულ ჩვილ ბავშვთა ფორმულაში HPLC-UV-ის გამოყენებით. მელამინის კონცენტრაციები მერყეობდა < 0.2-დან 2.52 მგ კგ−1-მდე. HPLC-UV მეთოდის წრფივი დინამიური დიაპაზონი იყო 0.05-დან 2.5 მგ-მდე კგ-1 ძროხის რძისთვის, 0.13-დან 6.25 მგ-მდე კგ-1 ჩვილის ფორმულისთვის <15% ცილის მასური ფრაქციით და 0.25-დან 12.5 მგ-მდე კგ-1 ჩვილის ფორმულისთვის 15% ცილის მასური ფრაქციით. LOD-ის (და LOQ-ის) შედეგები იყო 0.03 მგ კგ-1 (0.09 მგ კგ-1) ძროხის რძისთვის, 0.06 მგ კგ-1 (0.18 მგ კგ-1) ჩვილის ფორმულისთვის <15% ცილის შემცველობით და 0.12 მგ კგ-1 (0.36 მგ კგ-1) ჩვილის ფორმულისთვის 15% ცილის შემცველობით, შესაბამისად, სიგნალ-ხმაურის თანაფარდობით 3 და 1025 LOD-ისა და LOQ-სთვის. დიებესმა და სხვ. (2012) გამოიკვლიეს მელამინის დონე ჩვილის ფორმულისა და რძის ფხვნილის ნიმუშებში HPLC/DMD-ის გამოყენებით. ჩვილ ბავშვთა ფორმულაში ყველაზე დაბალი და ყველაზე მაღალი დონეები იყო შესაბამისად 9.49 მგ კგ−1 და 258 მგ კგ−1. გამოვლენის ზღვარი (LOD) იყო 0.05 მგ კგ−1.
ჯავაიდმა და სხვებმა აღნიშნეს, რომ ჩვილ ბავშვთა ფორმულაში მელამინის ნარჩენები ფურიეს გარდაქმნის ინფრაწითელი სპექტროსკოპიის (FT-MIR) გამოყენებით 0.002–2 მგ კგ−1 დიაპაზონში იყო (LOD = 1 მგ კგ−1; LOQ = 3.5 მგ კგ−1). რეზაიმ და სხვებმა27 შემოგვთავაზეს HPLC-DDA (λ = 220 ნმ) მეთოდი მელამინის შესაფასებლად და რძის ფხვნილისთვის მიაღწიეს 0.08 μg mL−1 LOQ-ს, რაც ამ კვლევაში მიღებულ დონეზე დაბალი იყო. სანმა და სხვებმა შეიმუშავეს RP-HPLC-DAD მელამინის თხევად რძეში მყარი ფაზის ექსტრაქციით (SPE) აღმოსაჩენად. მათ მიიღეს შესაბამისად 18 და 60 μg კგ−128 LOD და LOQ, რაც უფრო მგრძნობიარეა, ვიდრე ამჟამინდელი კვლევა. მონტესანო და სხვ. დადასტურდა HPLC-DMD მეთოდის ეფექტურობა ცილის დანამატებში მელამინის შემცველობის შესაფასებლად 0.05–3 მგ/კგ რაოდენობრივი განსაზღვრის ზღვრით, რაც ნაკლებად მგრძნობიარე იყო, ვიდრე ამ კვლევაში გამოყენებული მეთოდი29.
უდავოა, რომ ანალიტიკური ლაბორატორიები მნიშვნელოვან როლს ასრულებენ გარემოს დაცვაში სხვადასხვა ნიმუშში დამაბინძურებლების მონიტორინგით. თუმცა, ანალიზის დროს დიდი რაოდენობით რეაგენტებისა და გამხსნელების გამოყენებამ შეიძლება გამოიწვიოს საშიში ნარჩენების წარმოქმნა. ამიტომ, 2000 წელს შემუშავდა მწვანე ანალიტიკური ქიმია (GAC), რათა შემცირდეს ან აღმოიფხვრას ანალიტიკური პროცედურების უარყოფითი ზემოქმედება ოპერატორებსა და გარემოზე26. მელამინის იდენტიფიცირებისთვის გამოყენებულია ტრადიციული მელამინის აღმოჩენის მეთოდები, მათ შორის ქრომატოგრაფია, ელექტროფორეზი, კაპილარული ელექტროფორეზი და ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტული ანალიზი (ELISA). თუმცა, მრავალრიცხოვან აღმოჩენის მეთოდებს შორის, ელექტროქიმიურმა სენსორებმა დიდი ყურადღება მიიპყრო მათი შესანიშნავი მგრძნობელობის, სელექციურობის, სწრაფი ანალიზის დროისა და მომხმარებლისთვის მოსახერხებელი მახასიათებლების გამო30,31. მწვანე ნანოტექნოლოგია იყენებს ბიოლოგიურ გზებს ნანომასალების სინთეზირებისთვის, რამაც შეიძლება შეამციროს საშიში ნარჩენების წარმოქმნა და ენერგიის მოხმარება, რითაც ხელს უწყობს მდგრადი პრაქტიკის დანერგვას. მაგალითად, ეკოლოგიურად სუფთა მასალებისგან დამზადებული ნანოკომპოზიტები შეიძლება გამოყენებულ იქნას ბიოსენსორებს ისეთი ნივთიერებების აღმოსაჩენად, როგორიცაა მელამინი32,33,34.
კვლევა აჩვენებს, რომ მყარი ფაზის მიკროექსტრაქცია (SPME) ეფექტურად გამოიყენება ტრადიციულ ექსტრაქციის მეთოდებთან შედარებით მისი უფრო მაღალი ენერგოეფექტურობისა და მდგრადობის გამო. SPME-ს გარემოსდაცვითი კეთილგანწყობა და ენერგოეფექტურობა მას ანალიტიკურ ქიმიაში ტრადიციული ექსტრაქციის მეთოდების შესანიშნავ ალტერნატივად აქცევს და ნიმუშის მომზადების უფრო მდგრად და ეფექტურ მეთოდს წარმოადგენს35.
2013 წელს ვუმ და სხვებმა შეიმუშავეს მაღალმგრძნობიარე და შერჩევითი ზედაპირული პლაზმონური რეზონანსის (მინი-SPR) ბიოსენსორი, რომელიც იყენებს მელამინსა და ანტიმელამინის ანტისხეულებს შორის შეკავშირებას, რათა სწრაფად აღმოაჩინოს მელამინი ჩვილ ბავშვთა ფორმულაში იმუნოანალიზის გამოყენებით. SPR ბიოსენსორი, იმუნოანალიზთან ერთად (მელამინთან კონიუგირებული ძროხის შრატის ალბუმინის გამოყენებით), წარმოადგენს მარტივად გამოსაყენებელ და დაბალფასიან ტექნოლოგიას, რომლის აღმოჩენის ზღვარი მხოლოდ 0.02 μg mL-136-ია.
ნასირიმ და აბასიანმა გამოიყენეს მაღალი პოტენციალის მქონე პორტატული სენსორი გრაფენის ოქსიდ-ქიტოზანის კომპოზიტებთან (GOCS) კომბინაციაში კომერციულ ნიმუშებში მელამინის აღმოსაჩენად37. ამ მეთოდმა აჩვენა ულტრამაღალი სელექციურობა, სიზუსტე და რეაქცია. GOCS სენსორმა აჩვენა შესანიშნავი მგრძნობელობა (239.1 μM−1), 0.01-დან 200 μM-მდე წრფივი დიაპაზონი, 1.73 × 104 აფინურობის მუდმივა და 10 ნმ-მდე LOD. გარდა ამისა, ჩანდრასეხარის და სხვების მიერ 2024 წელს ჩატარებულმა კვლევამ მიიღო ეკოლოგიურად სუფთა და ეკონომიური მიდგომა. მათ გამოიყენეს პაპაიას ქერქის ექსტრაქტი, როგორც აღმდგენი აგენტი თუთიის ოქსიდის ნანონაწილაკების (ZnO-NPs) ეკოლოგიურად სუფთა მეთოდით სინთეზირებისთვის. შემდგომში, შემუშავდა უნიკალური მიკრო-რამანის სპექტროსკოპიის ტექნიკა ჩვილ ბავშვთა ფორმულაში მელამინის დასადგენად. სასოფლო-სამეურნეო ნარჩენებიდან მიღებულმა ZnO-NPs-მა აჩვენა პოტენციალი, როგორც ღირებული დიაგნოსტიკური ინსტრუმენტი და საიმედო, დაბალფასიანი ტექნოლოგია მელამინის მონიტორინგისა და აღმოჩენისთვის38.
ალიზადემ და სხვებმა (2024) რძის ფხვნილში მელამინის დასადგენად გამოიყენეს მაღალმგრძნობიარე მეტალ-ორგანული ჩარჩოს (MOF) ფლუორესცენტული პლატფორმა. სენსორის წრფივი დიაპაზონი და ქვედა აღმოჩენის ზღვარი, რომელიც განისაზღვრა 3σ/S-ის გამოყენებით, შესაბამისად, იყო 40-დან 396.45 ნმ-მდე (რაც 25 μg კგ−1-დან 0.25 მგ კგ−1-მდე ექვივალენტურია) და 40 ნმ (რაც 25 μg კგ−1-ის ექვივალენტურია). ეს დიაპაზონი გაცილებით დაბალია ჩვილის ფორმულაში (1 მგ კგ−1) და სხვა საკვების/საკვების ნიმუშებში (2.5 მგ კგ−1) მელამინის იდენტიფიკაციისთვის დადგენილ მაქსიმალურ ნარჩენ დონეებზე (MRLs). ფლუორესცენტურმა სენსორმა (ტერბიუმი (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) რძის ფხვნილში მელამინის აღმოჩენის უფრო მაღალი სიზუსტე და უფრო ზუსტი გაზომვის შესაძლებლობა აჩვენა, ვიდრე HPLC39. მწვანე ქიმიაში ბიოსენსორები და ნანოკომპოზიტები არა მხოლოდ აძლიერებენ აღმოჩენის შესაძლებლობებს, არამედ ამცირებენ გარემოსდაცვით საფრთხეებს მდგრადი განვითარების პრინციპების შესაბამისად.
მწვანე ქიმიის პრინციპები გამოყენებულია მელამინის განსაზღვრის სხვადასხვა მეთოდში. ერთ-ერთი მიდგომაა მწვანე დისპერსიული მყარი ფაზის მიკროექსტრაქციის მეთოდის შემუშავება, რომელიც იყენებს ბუნებრივ პოლარულ პოლიმერ β-ციკლოდექსტრინს, რომელიც ჯვარედინად არის დაკავშირებული ლიმონმჟავასთან, მელამინის ეფექტური ექსტრაქციისთვის 40 ისეთი ნიმუშებიდან, როგორიცაა ჩვილის ფორმულა და ცხელი წყალი. კიდევ ერთი მეთოდი იყენებს მანიხის რეაქციას რძის ნიმუშებში მელამინის დასადგენად. ეს მეთოდი არის იაფი, ეკოლოგიურად სუფთა და მაღალი სიზუსტით, 0.1–2.5 ppm ხაზოვანი დიაპაზონით და დაბალი აღმოჩენის ზღვრით 41. გარდა ამისა, შემუშავდა ეკონომიური და ეკოლოგიურად სუფთა მეთოდი თხევად რძესა და ჩვილის ფორმულაში მელამინის რაოდენობრივი განსაზღვრისთვის, ფურიეს გარდაქმნის ინფრაწითელი გამტარობის სპექტროსკოპიის გამოყენებით, მაღალი სიზუსტით და შესაბამისად 1 ppm და 3.5 ppm აღმოჩენის ზღვრებით 42. ეს მეთოდები აჩვენებს მწვანე ქიმიის პრინციპების გამოყენებას მელამინის განსაზღვრის ეფექტური და მდგრადი მეთოდების შემუშავებაში.
რამდენიმე კვლევაში შემოთავაზებულია მელამინის აღმოჩენის ინოვაციური მეთოდები, როგორიცაა მყარი ფაზის ექსტრაქციისა და მაღალეფექტური თხევადი ქრომატოგრაფიის (HPLC) გამოყენება43, ასევე სწრაფი მაღალეფექტური თხევადი ქრომატოგრაფიის (HPLC) გამოყენება, რომელიც არ საჭიროებს კომპლექსურ წინასწარ დამუშავებას ან იონური წყვილის რეაგენტებს, რითაც მცირდება ქიმიური ნარჩენების რაოდენობა44. ეს მეთოდები არა მხოლოდ იძლევა რძის პროდუქტებში მელამინის განსაზღვრის ზუსტ შედეგებს, არამედ შეესაბამება მწვანე ქიმიის პრინციპებს, ამცირებს საშიში ქიმიკატების გამოყენებას და ამცირებს ანალიტიკური პროცესის საერთო გარემოზე ზემოქმედებას.
სხვადასხვა ბრენდის ორმოცი ნიმუში სამჯერ იქნა გამოცდილი, შედეგები კი წარმოდგენილია ცხრილში 2. ჩვილის ფორმულისა და რძის ფხვნილის ნიმუშებში მელამინის დონე შესაბამისად 0.001-დან 0.004 მგ/კგ-მდე და 0.001-დან 0.095 მგ/კგ-მდე მერყეობდა. ჩვილის ფორმულის სამ ასაკობრივ ჯგუფს შორის მნიშვნელოვანი ცვლილებები არ დაფიქსირებულა. გარდა ამისა, მელამინი აღმოჩენილი იქნა რძის ფხვნილის 80%-ში, მაგრამ ჩვილის ფორმულების 65% დაბინძურებული იყო მელამინით.
სამრეწველო რძის ფხვნილში მელამინის შემცველობა უფრო მაღალი იყო, ვიდრე ჩვილ ბავშვთა ფორმულაში და სხვაობა მნიშვნელოვანი იყო (p<0.05) (სურათი 2).
მიღებული შედეგები FDA-ს მიერ დადგენილ ზღვრულ მაჩვენებლებზე დაბალი იყო (1 და 2.5 მგ/კგ-ზე ნაკლები). გარდა ამისა, შედეგები შეესაბამება CAC-ის (2010) და EU45,46-ის მიერ დადგენილ ზღვრულ მაჩვენებლებს, ანუ ჩვილის ხელოვნური კვებისთვის მაქსიმალური დასაშვები ლიმიტია 1 მგ კგ-1, ხოლო რძის პროდუქტებისთვის 2.5 მგ კგ-1.
განატის და სხვების მიერ 2023 წელს ჩატარებული კვლევის თანახმად, ირანში შეფუთული რძის სხვადასხვა სახეობაში მელამინის შემცველობა 50.7-დან 790 მკგ-მდე კგ−1-მდე მერყეობდა. მათი შედეგები FDA-ს მიერ დაშვებულ ზღვარზე დაბალი იყო. ჩვენი შედეგები შოდერის და სხვების48 და რიმას და სხვების49 შედეგებზე დაბალია. შოდერმა და სხვებმა (2010) აღმოაჩინეს, რომ ELISA-თი განსაზღვრული რძის ფხვნილში (n=49) მელამინის დონე 0.5-დან 5.5 მგ/კგ-მდე მერყეობდა. რიმამ და სხვებმა რძის ფხვნილში მელამინის ნარჩენები ფლუორესცენტული სპექტროფოტომეტრიით გააანალიზეს და აღმოაჩინეს, რომ რძის ფხვნილში მელამინის შემცველობა 0.72–5.76 მგ/კგ იყო. 2011 წელს კანადაში ჩატარდა კვლევა ჩვილ ბავშვთა ფორმულაში (n=94) მელამინის დონის მონიტორინგის მიზნით თხევადი ქრომატოგრაფიის (LC/MS) გამოყენებით. მელამინის კონცენტრაციები დასაშვებ ზღვარზე დაბალი აღმოჩნდა (წინასწარი სტანდარტი: 0.5 მგ კგ−1). ნაკლებად სავარაუდოა, რომ აღმოჩენილი მელამინის თაღლითური დონე ცილის შემცველობის გაზრდის ტაქტიკა ყოფილიყო. თუმცა, ეს არ შეიძლება აიხსნას სასუქების გამოყენებით, კონტეინერის შიგთავსის გადატანით ან მსგავსი ფაქტორებით. გარდა ამისა, კანადაში იმპორტირებულ რძის ფხვნილში მელამინის წყარო არ იყო გამჟღავნებული50.
ჰასანიმ და სხვებმა 2013 წელს ირანის ბაზარზე რძის ფხვნილსა და თხევად რძეში მელამინის შემცველობა გაზომეს და მსგავსი შედეგები მიიღეს. შედეგებმა აჩვენა, რომ რძის ფხვნილისა და თხევადი რძის ერთი ბრენდის გარდა, ყველა სხვა ნიმუში დაბინძურებული იყო მელამინით, რომლის დონეები მერყეობდა 1.50-დან 30.32 მკგ გ-მდე რძის ფხვნილში და 0.11-დან 1.48 მკგ მლ-მდე რძეში. აღსანიშნავია, რომ ციანურინის მჟავა არცერთ ნიმუშში არ აღმოჩნდა, რაც ამცირებს მომხმარებლებისთვის მელამინით მოწამვლის შესაძლებლობას. 51 წინა კვლევებმა შეაფასა მელამინის კონცენტრაცია შოკოლადის პროდუქტებში, რომლებიც შეიცავდნენ რძის ფხვნილს. იმპორტირებული ნიმუშების დაახლოებით 94% და ირანული ნიმუშების 77% შეიცავდა მელამინს. იმპორტირებულ ნიმუშებში მელამინის დონე მერყეობდა 0.032-დან 2.692 მგ/კგ-მდე, ხოლო ირანულ ნიმუშებში - 0.013-დან 2.600 მგ/კგ-მდე. საერთო ჯამში, მელამინი ნიმუშების 85%-ში აღმოჩნდა, თუმცა მხოლოდ ერთ კონკრეტულ ბრენდს ჰქონდა დასაშვებ ზღვარს გადაჭარბებული დონე.44 ტიტლმიერი და სხვები რძის ფხვნილში მელამინის დონის შესახებ იტყობინებიან 0.00528-დან 0.0122 მგ/კგ-მდე.
ცხრილი 3 აჯამებს რისკის შეფასების შედეგებს სამი ასაკობრივი ჯგუფისთვის. რისკი ყველა ასაკობრივ ჯგუფში 1-ზე ნაკლები იყო. ამრიგად, ჩვილ ბავშვთა ფორმულაში მელამინისგან ჯანმრთელობისთვის არაკანცეროგენული რისკი არ არსებობს.
რძის პროდუქტებში დაბინძურების დაბალი დონე შესაძლოა გამოწვეული იყოს მომზადების დროს შემთხვევითი დაბინძურებით, ხოლო მაღალი დონე შესაძლოა განპირობებული იყოს განზრახ დამატებებით. გარდა ამისა, მელამინის დაბალი დონის მქონე რძის პროდუქტების მოხმარებით ადამიანის ჯანმრთელობისთვის საერთო რისკი დაბალ დონეზე ითვლება. შეიძლება დავასკვნათ, რომ მელამინის ასეთი დაბალი დონის შემცველი პროდუქტების მოხმარება მომხმარებლის ჯანმრთელობისთვის არანაირ საფრთხეს არ წარმოადგენს52.
რძის ინდუსტრიაში სურსათის უვნებლობის მართვის მნიშვნელობის გათვალისწინებით, განსაკუთრებით საზოგადოებრივი ჯანმრთელობის დაცვის თვალსაზრისით, უაღრესად მნიშვნელოვანია რძის ფხვნილსა და ჩვილ ბავშვთა ფორმულაში მელამინის დონისა და ნარჩენების შეფასებისა და შედარების მეთოდის შემუშავება და ვალიდაცია. ჩვილ ბავშვთა ფორმულასა და რძის ფხვნილში მელამინის დასადგენად შემუშავდა მარტივი და ზუსტი HPLC-UV სპექტროფოტომეტრიული მეთოდი. მეთოდი ვალიდირებული იქნა მისი სანდოობისა და სიზუსტის უზრუნველსაყოფად. მეთოდის აღმოჩენისა და რაოდენობრივი განსაზღვრის ზღვრები საკმარისად მგრძნობიარე აღმოჩნდა ჩვილ ბავშვთა ფორმულასა და რძის ფხვნილში მელამინის დონის გასაზომად. ჩვენი მონაცემების თანახმად, მელამინი აღმოჩენილი იქნა ირანული ნიმუშების უმეტესობაში. ყველა აღმოჩენილი მელამინის დონე CAC-ის მიერ დადგენილ მაქსიმალურ დასაშვებ ზღვრებზე დაბალი იყო, რაც მიუთითებს, რომ ამ ტიპის რძის პროდუქტების მოხმარება არ წარმოადგენს საფრთხეს ადამიანის ჯანმრთელობისთვის.
გამოყენებული ყველა ქიმიური რეაგენტი იყო ანალიტიკური კლასის: მელამინი (2,4,6-ტრიამინო-1,3,5-ტრიაზინი) 99%-იანი სისუფთავით (Sigma-Aldrich, სენტ-ლუისი, მისური); HPLC კლასის აცეტონიტრილი (Merck, დარმშტადტი, გერმანია); ულტრასუფთა წყალი (Millipore, მორფჰაიმი, საფრანგეთი). ერთჯერადი შპრიცის ფილტრები (Chromafil Xtra PVDF-45/25, ფორების ზომა 0.45 მკმ, მემბრანის დიამეტრი 25 მმ) (Macherey-Nagel, დიურენი, გერმანია).
ნიმუშების მოსამზადებლად გამოყენებული იქნა ულტრაბგერითი აბაზანა (ელმა, გერმანია), ცენტრიფუგა (ბეკმან კოულტერი, კრეფელდი, გერმანია) და HPLC (KNAUER, გერმანია).
გამოყენებული იქნა მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფი (KNAUER, გერმანია), რომელიც აღჭურვილი იყო ულტრაიისფერი დეტექტორით. HPLC ანალიზის პირობები შემდეგი იყო: გამოყენებული იქნა UHPLC Ultimate სისტემა, რომელიც აღჭურვილი იყო ODS-3 C18 ანალიტიკური სვეტით (4.6 მმ × 250 მმ, ნაწილაკების ზომა 5 მკმ) (MZ, გერმანია). HPLC ელუენტი (მობილური ფაზა) იყო TFA/მეთანოლის ნარევი (450:50 მლ) 1 მლ წთ-1 ნაკადის სიჩქარით. აღმოჩენის ტალღის სიგრძე იყო 242 ნმ. ინექციის მოცულობა იყო 100 მკლ, სვეტის ტემპერატურა 20 °C. რადგან პრეპარატის შეკავების დრო ხანგრძლივია (15 წუთი), შემდეგი ინექცია უნდა განხორციელდეს 25 წუთის შემდეგ. მელამინი იდენტიფიცირებული იქნა მელამინის სტანდარტების შეკავების დროისა და ულტრაიისფერი სპექტრის პიკის შედარებით.
მელამინის სტანდარტული ხსნარი (10 მკგ/მლ) მომზადდა წყლის გამოყენებით და შეინახეს მაცივარში (4°C) სინათლისგან დაცულ ადგილას. გააზავეთ საწყისი ხსნარი მოძრავი ფაზით და მოამზადეთ სამუშაო სტანდარტული ხსნარები. თითოეული სტანდარტული ხსნარი შეიყვანეს HPLC-ში 7-ჯერ. კალიბრაციის განტოლება 10 გამოითვალა განსაზღვრული პიკის ფართობისა და განსაზღვრული კონცენტრაციის რეგრესიული ანალიზით.
კომერციულად ხელმისაწვდომი ძროხის რძის ფხვნილი (20 ნიმუში) და ძროხის რძეზე დამზადებული სხვადასხვა ბრენდის ჩვილის ფორმულის ნიმუშები (20 ნიმუში) შეძენილი იქნა ირანის ადგილობრივი სუპერმარკეტებიდან და აფთიაქებიდან სხვადასხვა ასაკობრივი ჯგუფის (0–6 თვე, 6–12 თვე და >12 თვე) ჩვილების კვებისათვის და ანალიზამდე ინახებოდა მაცივრის ტემპერატურაზე (4°C). შემდეგ, 1 ± 0.01 გ ჰომოგენიზებული რძის ფხვნილი აიწონა და შეერია აცეტონიტრილს: წყალს (50:50, v/v; 5 მლ). ნარევი მოურიეს 1 წუთის განმავლობაში, შემდეგ დაამუშავეს ულტრაბგერით აბაზანაში 30 წუთის განმავლობაში და ბოლოს შეანჯღრიეს 1 წუთის განმავლობაში. შემდეგ ნარევი დაცენტრიფუგირდა 9000 × g-ზე 10 წუთის განმავლობაში ოთახის ტემპერატურაზე და ზედაპირული სითხე გაფილტრეს 2 მლ ავტოსემპლერის ფლაკონში 0.45 μm შპრიცის ფილტრის გამოყენებით. შემდეგ ფილტრატი (250 μl) შეერია წყალს (750 μl) და შეიყვანეს HPLC სისტემაში10,42.
მეთოდის ვალიდაციისთვის, ჩვენ განვსაზღვრეთ აღდგენა, სიზუსტე, აღმოჩენის ზღვარი (LOD), რაოდენობრივი განსაზღვრის ზღვარი (LOQ) და სიზუსტე ოპტიმალურ პირობებში. LOD განისაზღვრა, როგორც ნიმუშის შემცველობა, რომლის პიკის სიმაღლე სამჯერ აღემატება საბაზისო ხმაურის დონეს. მეორეს მხრივ, ნიმუშის შემცველობა, რომლის პიკის სიმაღლე 10-ჯერ აღემატება სიგნალ-ხმაურის თანაფარდობას, განისაზღვრა, როგორც LOQ.
მოწყობილობის რეაქცია განისაზღვრა შვიდი მონაცემთა წერტილისგან შემდგარი კალიბრაციის მრუდის გამოყენებით. გამოყენებული იქნა მელამინის სხვადასხვა შემცველობა (0, 0.2, 0.3, 0.5, 0.8, 1 და 1.2). განისაზღვრა მელამინის გამოთვლის პროცედურის წრფივობა. გარდა ამისა, ცარიელ ნიმუშებს დაემატა მელამინის რამდენიმე განსხვავებული დონე. კალიბრაციის მრუდი აგებული იქნა სტანდარტული მელამინის ხსნარის 0.1–1.2 მკგ მლ−1 უწყვეტი ინექციით ჩვილის ფორმულისა და ფხვნილის რძის ნიმუშებში და მისი R2 = 0.9925. სიზუსტე შეფასდა პროცედურის განმეორებადობითა და რეპროდუცირებადობით და მიღწეული იქნა ნიმუშების პირველ და მომდევნო სამ დღეს (სამჯერად) ინექციით. მეთოდის განმეორებადობა შეფასდა დამატებული მელამინის სამი განსხვავებული კონცენტრაციისთვის RSD %-ის გამოთვლით. სიზუსტის დასადგენად ჩატარდა აღდგენის კვლევები. ექსტრაქციის მეთოდით აღდგენის ხარისხი გამოითვალა მელამინის კონცენტრაციის სამ დონეზე (0.1, 1.2, 2) ჩვილის ფორმულისა და მშრალი რძის ნიმუშებში9,11,15.
სავარაუდო დღიური მიღება (EDI) განისაზღვრა შემდეგი ფორმულის გამოყენებით: EDI = Ci × Cc/BW.
სადაც Ci არის მელამინის საშუალო შემცველობა, Cc არის რძის მოხმარება, ხოლო BW არის ბავშვების საშუალო წონა.
მონაცემთა ანალიზი ჩატარდა SPSS 24-ის გამოყენებით. ნორმალობა შემოწმდა კოლმოგოროვ-სმირნოვის ტესტის გამოყენებით; ყველა მონაცემი იყო არაპარამეტრული ტესტები (p = 0). ამიტომ, ჯგუფებს შორის მნიშვნელოვანი განსხვავებების დასადგენად გამოყენებული იქნა კრუსკალ-უოლისის ტესტი და მენ-უიტნის ტესტი.
ინგელფინგერი, უმცროსი. მელამინი და მისი გავლენა გლობალურ საკვების დაბინძურებაზე. New England Journal of Medicine 359(26), 2745–2748 (2008).
ლინჩი, რ.ა. და სხვ. pH-ის გავლენა მელამინის მიგრაციაზე ბავშვთა თასებში. საკვების დაბინძურების საერთაშორისო ჟურნალი, 2, 1–8 (2015).
ბარეტი, მ.პ. და გილბერტი, ი.ჰ. ტოქსიკური ნაერთების ტრიპანოსომების შიდა ნაწილში მიზანმიმართული გამოყენება. პარაზიტოლოგიის პროგრესი 63, 125–183 (2006).
ნირმანი, მ.ფ. და სხვ. მელამინის დენდრიმერების, როგორც წამლის მიწოდების საშუალებების, in vitro და in vivo შეფასება. ფარმაციის საერთაშორისო ჟურნალი, 281(1–2), 129–132(2004).
ჯანდაცვის მსოფლიო ორგანიზაცია. ექსპერტთა შეხვედრები 1–4 მელამინისა და ციანური მჟავას ტოქსიკოლოგიური ასპექტების განსახილველად (2008).
ჰოუ, ა.კ.-ს., კვანი, თ.ჰ. და ლი, პ.კ.-თ. მელამინის ტოქსიკურობა და თირკმელი. ნეფროლოგიის ამერიკული საზოგადოების ჟურნალი 20(2), 245–250 (2009).
ოზთურქი, ს. და დემირი, ნ. რძის პროდუქტებში მელამინის იდენტიფიკაციისთვის მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფიის (HPLC) გამოყენებით ახალი IMAC ადსორბენტის შემუშავება. საკვების სინთეზისა და ანალიზის ჟურნალი 100, 103931 (2021).
ჩანსუვარნი, ვ., პანიკი, ს. და იმიმი, ა. მელამინის მარტივი სპექტროფოტომეტრიული განსაზღვრა თხევად რძეში მანიხის გრინის რეაქციის საფუძველზე. სპექტროქიმ. აქტა, ნაწილი A, მოლ. ბიომოლი. სპექტროსკ. 113, 154–158 (2013).
დიბსი, მ. და ელ-ჰაბიბი, რ. მელამინის განსაზღვრა ჩვილ ბავშვთა ფორმულაში, რძის ფხვნილსა და პანგასიუსის ნიმუშებში HPLC/დიოდური მასივის ქრომატოგრაფიით. გარემოსდაცვითი ანალიტიკური ტოქსიკოლოგიის ჟურნალი, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012).
სკინერი, კ.გ., თომასი, ჯ.დ. და ოსტერლოჰი, ჯ.დ. მელამინის ტოქსიკურობა. სამედიცინო ტოქსიკოლოგიის ჟურნალი, 6, 50–55 (2010).
ჯანდაცვის მსოფლიო ორგანიზაცია (WHO), მელამინისა და ციანური მჟავას ტოქსიკოლოგია და ჯანმრთელობის ასპექტები: ჯანდაცვის კანადის ჯანდაცვის მიერ მხარდაჭერილი ჯანდაცვის მსოფლიო ორგანიზაციისა და FAO-ს ექსპერტების ერთობლივი შეხვედრის ანგარიში, ოტავა, კანადა, 2008 წლის 1-4 დეკემბერი (2009).
კორმა, ს.ა. და სხვ. ახალი ფუნქციური სტრუქტურული ლიპიდების შემცველი ჩვილის ფორმულის ფხვნილისა და კომერციული ჩვილის ფორმულის ლიპიდური შემადგენლობისა და ხარისხის შედარებითი კვლევა. ევროპის კვების კვლევა და ტექნოლოგია 246, 2569–2586 (2020).
ელ-ვასიფი, მ. და ჰაშემი, ჰ. პალმის ზეთის გამოყენებით ჩვილის ფორმულის კვებითი ღირებულების, ხარისხობრივი მახასიათებლებისა და შენახვის ვადის გაუმჯობესება. ახლო აღმოსავლეთის სოფლის მეურნეობის კვლევის ჟურნალი 6, 274–281 (2017).
იინი, ვ. და სხვ. მელამინის საწინააღმდეგო მონოკლონური ანტისხეულების წარმოება და არაპირდაპირი კონკურენტული ELISA მეთოდის შემუშავება მელამინის აღმოსაჩენად ნედლ რძეში, რძის მშრალ რძესა და ცხოველთა საკვებში. სოფლის მეურნეობისა და კვების ქიმიის ჟურნალი 58(14), 8152–8157 (2010).


გამოქვეყნების დრო: 2025 წლის 11 აპრილი